2021年8月《藥物設(shè)計、開發(fā)及療法》期刊發(fā)表了文章銀杏酮酯聯(lián)合阿司匹林協(xié)同抗血小板作用研究。

文章摘要

銀杏酮酯聯(lián)合阿司匹林協(xié)同抗血小板作用研究

目的: 通過體外模型研究銀杏酮酯(GBE50)與阿司匹林聯(lián)合應(yīng)用的協(xié)同抗血小板作用。

方法: 以花生四烯酸(AA)、血小板活化因子(PAF)、二磷酸腺苷(ADP)和膠原蛋白為誘導(dǎo)物。利用兔血制備貧血小板血漿和富血小板血漿，檢測 GBE50 （0.01 mg/ml-3 mg/ml）、阿司匹林（0.01 mg/ml-3 mg/ml）及GBE50 與阿司匹林 1:1（0.01 mg/ml-3 mg/ml）聯(lián)用的抗血小板作用。采用 Synergy finder 分析 GBE50 與阿司匹林是否有協(xié)同抗血小板作用。通過UPLC-Q/TOF-MS分析鑒定 GBE50 中的化學(xué)成分，并通過 TCMSP 數(shù)據(jù)庫篩選活性化合物。銀杏酮酯活性成分和阿司匹林的靶點(diǎn)均在 TCMSP、CCGs、Swiss target prediction 及 DrugBank 等數(shù)據(jù)庫中獲得。涉及血小板聚集的相關(guān)靶點(diǎn)從GenCLiP數(shù)據(jù)庫中獲取。構(gòu)建化合物-血小板聚集靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)行GO和KEGG富集分析，以識別銀杏酮酯和阿司匹林聯(lián)合抗血小板作用關(guān)鍵的生物過程和信號通路。采用ELISA法檢測在體外模型中檢測銀杏酮酯和阿司匹林單獨(dú)應(yīng)用及二者 1：1 聯(lián)合給藥后血栓素B2 (TXB2)、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)和PAF受體(PAFR)水平，以確定 GBE50、阿司匹林及其聯(lián)合用藥對上述通路的影響。

藥物聯(lián)合協(xié)同圖。
注:AA (A)、PAF (B)、ADP (C)、膠原蛋白(D)誘導(dǎo)血小板聚集的聯(lián)合用藥相互作用分析。聯(lián)合用藥為0.01 mg/mL GBE50 + 0.01 mg/mL阿司匹林、0.03 mg/mL GBE50 + 0.03 mg/mL阿司匹林、0.1 mg/mL GBE50 + 0.1 mg/mL阿司匹林、0.3 mg/mL GBE50 + 0.3 mg/mL阿司匹林、1mg /mL GBE50 + 1mg /mL阿司匹林和3mg /mL GBE50 + 3mg /mL阿司匹林。結(jié)果為三個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的均值±S.E.M.。在圖中，協(xié)同和拮抗劑量區(qū)域用紅色和綠色突出顯示。

結(jié)果: 與銀杏酮酯或阿司匹林單獨(dú)應(yīng)用相比，二者 1：1 聯(lián)合應(yīng)用對 AA、ADP、PAF 和膠原誘導(dǎo)的血小板聚集都有很強(qiáng)的抑制作用，聯(lián)合應(yīng)用半抑制濃度（IC50）分別為：0.067 mg/ml、 1.474 mg/ml、0.2886 mg/ml 和 0.149 mg/ml。協(xié)同分析顯示，在 AA 誘導(dǎo)的血小板聚集中，銀杏酮酯聯(lián)合阿司匹林可發(fā)揮協(xié)同抗血小板作用，而在 ADP、PAF 和膠原誘導(dǎo)的血小板聚集中發(fā)揮相加抗血小板作用。經(jīng)成分鑒定及活性篩選后，銀杏酮酯中有7個成分被認(rèn)定為潛在的抗血小板活性成分。成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖及富集分析表明，銀杏酮酯主要通過 cAMP 通路、AA 代謝及鈣離子信號調(diào)節(jié)血小板聚集。阿司匹林主要通過 AA 代謝及血小板活化通路調(diào)節(jié)血小板聚集。ELISA 實(shí)驗(yàn)表明銀杏酮酯聯(lián)合阿司匹林可以顯著增加血小板內(nèi) cAMP 水平，降低 TXB2 和 PAFR 的水平。
結(jié)論: GBE50 聯(lián)合阿司匹林可增強(qiáng)抗血小板作用。它們在抑制血小板聚集方面具有協(xié)同和加強(qiáng)作用。其機(jī)制可能與增加血小板 cAMP 水平，降低 TXB2 和 PAFR 水平有關(guān)。該研究闡述了銀杏酮酯（GBE50）作為治療血栓相關(guān)疾病的應(yīng)用價值。
關(guān)鍵詞:銀杏葉，阿司匹林，抗血小板，協(xié)同作用，中草藥，花生四烯酸

全文為The Synergistic Effect of Ginkgo biloba Extract 50 and Aspirin Against Platelet Aggregation.Drug Design, Development and Therapy 2021:15 3543–3560.